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疏水層析填料

疏水作用層析是根據分子表面疏水性不同來分離生物大分子的一種方法。蛋白質和多肽等生物大分子的表面常常暴露著一些疏水性基團,我們把這些疏水性基團稱爲疏水補丁,疏水補丁可以與疏水性層析介質發生疏水性相互作用而結合。不同的分子由于疏水性不同,它們與疏水性層析介質之間的疏水性作用力強弱不同,疏水作用層析就是依據這一原理分離純化蛋白質和多肽等生物大分子的。

選擇疏水作用層析介質的關鍵在于選擇合適的疏水強弱的配基,弱蛋白質的疏水性較強就需要選擇較弱的疏水介質,反之亦然,爲了增強蛋白質和疏水介質的結合需要在緩沖液中加入一定量的鹽(通常是硫酸铵)。弱蛋白質本身疏水性較強,就不需要加太多的鹽,爲了提高分辨率可以選擇顆粒較小的疏水介質。

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産品名稱 規格 市場價 數量
HF6033 Phenyl Tanrose 6FF (High Sub),1L 登錄后查看
HF6032 Phenyl Tanrose 6FF (High Sub),500mL 登錄后查看
HF6031 Phenyl Tanrose 6FF (High Sub),100mL 登錄后查看
HF6030 Phenyl Tanrose 6FF (High Sub),25mL 登錄后查看
HF6043 Phenyl Tanrose 6HP,1L 登錄后查看
HF6042 Phenyl Tanrose 6HP,500mL 登錄后查看
HF6041 Phenyl Tanrose 6HP,100mL 登錄后查看
HF6040 Phenyl Tanrose 6HP,25mL 登錄后查看
HF6023 Phenyl Tanrose 6FF (Low Sub),1L 登錄后查看
HF6022 Phenyl Tanrose 6FF (Low Sub),500mL 登錄后查看
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影響疏水層析的因素

      *蛋白质的疏水性强弱取决于其表面疏水基团的分布。

      *盐的种类及浓度,组成缓冲液中盐的某些离子对蛋白质的构象有稳定作用,如 SO42- 可提高蛋白结构的稳定性,使蛋白的溶解度下降,对蛋白有盐析效应,使蛋白同配基间疏水作用增强。还有些离子对于蛋白质构象具有不稳定作用,如 Cl-、Ca2+ 可增加蛋白质的溶解度,这类离子洗脱能力较强。盐析和盐溶的特性可作为选择疏水介质平衡和洗脱条件的依据,常用的疏水配基的疏水性强弱和疏水作用离子排列如下:

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*疏水層析過程中,溫度升高,疏水作用增強,有利于提高層析柱的分離度,但對于生物活性物質來說,高溫條件會使其變性失活,因此疏水層析通常在常溫或者低溫中進行,建議維持室溫。

      *疏水层析流动相的PH通常为中性的磷酸盐缓冲液。蛋白质同疏水基团的作用力随PH升高而降低,因为蛋白质的酸性基团随PH升高所带电荷逐渐增多,亲水性增强。但在疏水层析中通常不采用改变溶液的PH来改变蛋白质的疏水性。

Phenyl/Butyl/Octyl/Butyl-S Tanrose FF 快流速琼脂糖基架疏水层析介质

      Phenyl Tanrose 6FF 属于芳香族疏水介质,疏水性最强。根据配基取代程度不同分为:高取代(High Sub简称HS)和低取代(Low Sub简称LS)两种介质。苯基通过不带电,化学性质稳定的醚键连接到琼脂糖上。

      Butyl Tanrose 4FF 和Octyl Tanrose 4FF 这两种介质属于脂肪族疏水介质,Butyl Tanrose 4FF 配基为丁基,Octyl Tanrose 4FF 配基为辛基:这两种配基通过不带电且化学稳定性的醚键同高度交联的琼脂糖偶联而成。

      Butyl-S Tanrose 6FF 是疏水性最弱的疏水介质,适合在较低盐浓度条件下纯化强疏水性分子,可去除脂肪类,脂蛋白,色素等,在酵母重组表达乙肝疫苗纯化过程中发挥重要作用。

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